1. 同一个样品，为什么有时候有折线，有时候出峰很正常？
激光器的影响很大。下图是一个样品，不同的激光器测试，对于532和785 nm激光，拉曼信号被荧光淹没；但405 nm激光则很容易分辨。 但是仔细辨认其实出峰位置不会变化，说明改变激光器并不会改变出峰位置，只有当样品分子结构发生变化才会出现峰位置的变化。
2. 如何选择合适的激光器？
激发波长的选择
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波长范围 |
激发波长 |
优点 |
缺点 |
应用领域 |
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紫外 |
325 |
能量高（激发效率高），拉曼散射效应强，提高了空间分辨率，抑制荧光 |
容易损伤样品，激光器成本很高，对滤波要求高（光学镜片要求高） |
荧光强的样品（石化类、生物类(DNA、RNA、蛋白质）、共振实验室） |
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可见 |
488、514 532、633 |
应用范围广 |
荧光信号强 |
材料、化学、化学反应（无机材料）、生物医学、共振（石墨烯、碳材料）、表面增强 |
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红外 |
785、830、1064 |
荧光干扰小 |
激发能量低（激发效率低）、拉曼信号弱 |
抑制荧光、化工类、生物组织、有机组织 |
激光波长的选择对于实验的结果有着重要的影响：
1）灵敏度：拉曼散射强度与激光波长的四次方成反比，因此，蓝/绿可见激光的散射强度比近红外激光要强15倍以上。
2）空间分辨率：在衍射极限条件下，激光光斑的直径可以根据公式计算得出，其中是激发激光的波长，是所使用显微物镜的数值孔径。例如，采用数值孔径为0.9的物镜，波长532 nm激光的光斑直径理论上可以小到0.72微米，在同样条件下使用785 nm波长激光时，激光光斑直径理论上最小值为1.1微米，因此，最终的空间分辨率在一定程度上取决于激发激光的选择。
3)可以基于样品特性对激发波长进行优化：激发光波长的选择一般是为了避开荧光的干扰，因为拉曼位移与激发光频率无关，不同物质产生荧光的范围不同，只要能避开该物质的荧光带的激发光都是可以的。例如，蓝/绿色激光（440－565 nm）适合无机材料和共振拉曼实验（如碳纳米管和其它碳材料）以及表面增强拉曼实验（SERS）；红色和近红外激光（660－830nm）适合于抑制样品荧光；紫外激光适合生物分子（蛋白质、DNA、RNA等）的共振拉曼实验以及抑制样品荧光。
3. 拉曼的检测深度是多少呢？
拉曼是表面测试，探测深度只有10nm左右，光斑1um大小，样品均匀性对结果影响很大，如果测试出来结果没有出峰，说明在那个位置是没有该物质结构存在。